
مطالعات انجام شده در سالهای اخیر نشان میدهند که سوراخ کردن مصنوعی بلاستوسیست قبل از انجماد شیشه ای، در بهبود کیفیت رویانهای ذوب شده موثر است. اما در این مطالعات، به نقش آب درون حفره و تاثیر آن بر روی تشکیل ردههای سلولی بلاستوسیست، توجه نشده است. بنابراین در تحقیق حاضر، علاوه بر ارزیابی نرخ زندهمانی و خروج از زونا، اثر کاهش مایع بلاستوسل قبل از انجماد شیشه ای، بر روی میزان بیان ژنهای Gata6 و Grb2 در بلاستوسیست درونتنی و برونتنی منجمد-ذوب شده و سوراخ شده قبل از انجماد بررسی شد و با گروه کنترل مقایسه گردید. در این مطالعه، میزان خروج از زونا با سوراخ کردن مصنوعی بلاستوسیست قبل از انجماد، بهصورت معنیداری افزایش یافت. این در حالی است که میزان زندهمانی در گروه های تحت تیمار، مشابه با گروه کنترل، بالا بود. انجماد شیشه ای موجب افزایش در میزان بیان ژنهای Gata6 و Grb2 شد (p<0.05). اما با کاهش مایع بلاستوسل قبل از انجماد، در بلاستوسیستهای درونتنی، میزان بیان این ژنها نسبت به گروه انجماد شیشهای به صورت معنیداری کاهش پیدا کرد و به گروه کنترل نزدیک شد (p<0.05). در حالی که در مورد بلاستوسیستهای برونتنی، با استفاده از این تکنیک، بیان ژن Grb2 افزایش پیدا کرد ولی تفاوت معنیداری در میزان بیان ژن Gata6 نسبت به گروه انجماد شیشهای ایجاد نشد. از آنجایی که هیچ نتیجه ای مبنی بر تاثیر منفی استفاده از این تکنیک مشاهده نگردید و با توجه به افزایش میزان خروج از زونا، کاهش حجم مایع بلاستوسل قبل از انجماد شیشهای میتواند مفید واقع شود.
نوع فایل :word
تعداد صفحات :۱۰۱
*———————————–*
۱-۱ تکوین پیش از لانه گزینی در موش
۱-۱-۲ تکوین اولیه
۱-۱-۳ مکانیسمهای مولکولی دخیل در لایهزایی رویان
۱-۱-۳-۱ جدایی دو ردهی سلولی تروفواکتودرم و توده سلولی داخلی
۱-۱-۳-۲ جدایی دو ردهی سلولی اپیبلاست و اندودرم اولیه
۱-۲ تکنیکهای کمک باروری
۱-۲-۱ لقاح آزمایشگاهی
۱-۲-۱-۱ کیفیت سلول تخم
۱-۲-۲ کشت آزمایشگاهی رویان
۱-۲-۳ انجماد
۱-۲-۳-۱ اصول انجماد
۱-۲-۳-۲ مواد سرما محافظ
۱-۲-۳-۳ روشهای انجماد
۱-۲-۳-۳-۱ انجماد آهسته
۱-۲-۳-۳-۲ انجماد شیشهای
۱-۲-۴ سوراخ کردن مصنوعی
۲ مواد و روشها
۲-۱ حیوان
۲-۲ تولید رویان آزمایشگاهی۲۶
۲-۲-۱ استحصال اسپرم
۲-۲-۱-۱ آمادهسازی محیط و قطرهها
۲-۲-۱-۲ جابجایی مهرهی گردنی
۲-۲-۱-۳ تشریح موش نر و جداسازی اپیدیدیم
۲-۲-۱-۴ جمعآوری و ظرفیتپذیری اسپرم
۲-۲-۲ استحصال تخمک
۲-۲-۲-۱ تحریک تخمکگذاری
۲-۲-۲-۱-۱ تزریق داخل صفاقی
۲-۲-۲-۲ آمادهسازی محیط و قطرهها
۲-۲-۲-۳ جابجایی مهرهی گردنی
۲-۲-۲-۴ تشریح موش ماده و جداسازی لولهی تخمبر
۲-۲-۲-۵ جداسازی تودهی تخمک-کومولوس
۲-۲-۳ لقاح آزمایشگاهی
۲-۲-۳-۱ آمادهسازی محیط و قطرهها
۲-۲-۳-۲ لقاح
۲-۲-۴ کشت آزمایشگاهی
۲-۲-۴-۱ آمادهسازی محیط و قطرهها
۲-۲-۴-۲ کشت رویان
۲-۳ تولید رویان درونتنی
۲-۳-۱ تحریک تخمکگذاری و جفت اندازی موشها
۲-۳-۲ آمادهسازی محیط و قطرهها
۲-۳-۳ جابجایی مهرهی گردنی
۲-۳-۴ تشریح موش ماده و جداسازی لولههای رحمی
۲-۳-۵ استحصال بلاستوسیست
۲-۴ سوراخ کردن مصنوعی بلاستوسیست
۲-۴-۱ آمادهسازی محیط و قطرهها
۲-۴-۲ آمادهسازی و تنظیم دستگاه ریزدستکاری
۲-۴-۳ روش کار
۲-۵ انجماد رویان
۲-۵-۱ انجماد شیشهای
۲-۵-۱-۱ آمادهسازی محیط و قطرهها
۲-۵-۱-۲
۰۲/۰۵/۲۰۰۲
۲-۵-۲-۱ آمادهسازی محیط و قطرات
۲-۵-۲-۲
۲-۶ بررسی بیان ژن۴۵
۲-۶-۱ استخراج RNA از بلاستوسیست
۲-۶-۲ ساخت cDNA
۲-۶-۳ طراحی پرایمر
۲-۶-۴ رقیقسازی پرایمرها
۲-۶-۵ واکنش زنجیرهای پلیمراز
۲-۶-۶ ژل الکتروفورز محصولات PCR
۲-۶-۷ واکنش زنجیرهای پلیمراز در زمان واقعی
۲-۷ طراحی آزمایش
۲-۷-۱ کاهش مایع بلاستوسل رویانهای درونتنی موش، قبل از انجماد شیشهای۵۲
۲-۷-۲ کاهش مایع بلاستوسل رویانهای برونتنی موش، قبل از انجماد شیشهای۵۲
۲-۷-۳ آنالیز آماری
۳ نتایج
۳-۱ کاهش مایع بلاستوسل رویانهای درونتنی موش قبل از انجماد شیشهای
۳-۱-۱ نرخ زندهمانی و خروج از زونا
۳-۱-۲ بیان نسبی ژنهای Gata6 و Grb2
۳-۱-۲-۱ واکنش زنجیرهای پلیمراز
۳-۱-۲-۲ واکنش زنجیرهای پلیمراز در زمان واقعی
۳-۲ کاهش مایع بلاستوسل رویانهای برونتنی موش قبل از انجماد شیشهای
۳-۲-۱ نرخ زندهمانی و خروج از زونا
۳-۲-۲ بیان نسبی ژنهای Gata6 و Grb2
محصول های مرتبط
بررسی تأثیر پلی مورفیسم کدون 164 ژن گیرنده بتا
یکی از اختلالات شایع غدد اندوکرین در زنان، سندرم تخمدان پلی کیستیک (PCOS) می باشد. فرم کلاسیک این سندرم به…
ارتباط پلی مورفیسم TaqI گیرنده ویتامین D (VDR ) با سرطان پستان در شمال ایران
مقدمه: سرطان پستان شایع ترین سرطان در بین زنان است که هزینههای سنگینی را به بیمار و جامعه تحمیل میکند.بنابراین…
بررسی اثرضد ویروسی عصاره گیاه مرزه علیه ویروس هرپس سیمپلکس تیپ یک درکشت سلول
ویروس هرپس سیمپلکس تیپ یک در خانواده هرپس ویریده قرار دارد. این ویروس طیفی از بیماریها شامل التهاب حاد مخاط…
بررسی تنوع ژن Coa در استافیلوکوکوس اورئوس های جدا شده از نمونه های بالینی در رشت
استافیلوکوکوس اورئوس از عوامل بیماریزای متداول در انسان و دام است که طیف وسیعی از بیماریها را ایجاد میکند و…
بیان وتخلیص پروتئین نوترکیب DR2418 داینوکوکوس رادیودورانس در اشریشیا کلی
زمینه و اهداف: داینوکوکوس رادیودورانس یکی از میکروارگانیسم های مقاوم به پرتو است و می تواند در محیط های خشن…
تشخیص برخی از سرووارهای سالمونلا انتریکا به کمک Multiplex PCR در موارد اسهالی ارجاعی به بیمارستانهای سبزوار
عفونتهای سالمونلایی که عفونت های غذایی نامیده میشوند، ممکن است توسط هر یک از سرووارها ایجاد شود. معمولا باکتری عامل…
قوانین ثبت دیدگاه